Cinética enzimática, regulação e enzimas séricas como marcador diagnóstico

1. A HMG-CoA redutase atua na etapa que controla a taxa de síntese do colesterol.
2. As estatinas são inibidores COMPETITIVOS dessa enzima.
3. Pela definição geral de inibição competitiva (e não por dado específico da estatina): o inibidor liga reversivelmente ao sítio ativo e pode ser deslocado dele por concentração alta de substrato.
4. A inibição da enzima leva a aumento da expressão do receptor hepático de LDL (LDLR).
5. Aumenta a depuração do LDL da circulação; o grau de redução do LDL-c depende da dose e varia entre as estatinas.

1. Enzimas alostéricas são enzimas reguladoras-chave: controlam a atividade de vias metabólicas respondendo a inibidores e ativadores.
2. Segundo a descrição usual da revisão: T = baixa afinidade, R = alta afinidade; ao ligar substrato a proteína muda de forma e passa para R.
3. Moléculas que ligam a sítios reguladores estabilizam o estado T (inibidores alostéricos) ou levam ao estado R (ativadores alostéricos).
4. Exemplo: a aspartato transcarbamoilase (ATCase) catalisa o primeiro passo comprometido da síntese dos nucleotídeos de pirimidina.
5. O produto final da via, o CTP, é inibidor alostérico da ATCase: retroalimentação negativa, elemento da homeostase bioquímica da célula.

A ALT está principalmente nos hepatócitos, com concentrações menores no coração, no rim e no músculo; a AST também está no fígado, mas tem outros sítios em que sua presença não é pequena. Na célula, a AST está na mitocôndria e no citoplasma, e a ALT no citoplasma e não na mitocôndria.

Na lesão do hepatócito há liberação de aminotransferases das células, e o resultado é aumento dos níveis séricos. Quanto mais restrita ao fígado é a distribuição da enzima, mais o aumento dela aponta o fígado — por isso a ALT é a mais específica de lesão hepatocelular, e o aumento da AST exige cautela por causa dos outros tecidos. A localização mitocondrial da AST, somada ao fato de o álcool ser toxina mitocondrial e de a absorção de piridoxal fosfato ficar baixa no uso pesado de álcool, é a explicação oferecida para a razão AST:ALT elevada.

A FA é encontrada principalmente no trato hepatobiliar, no osso e na placenta, e em menor grau no tecido intestinal; o aumento da GGT vem de doença biliar ou do hepatócito, e não de doença óssea.

Como a FA tem origem em mais de um tecido, um valor isolado de FA aumentada não diz de onde veio; a GGT, que não sobe na doença óssea, é o teste usado para decidir se a FA aumentada é hepatobiliar ou óssea.

• Inibidor competitivo (liga o sítio ativo, semelhante ao substrato) · O Km AUMENTA e o Vmax não muda; o inibidor pode ser deslocado por concentração alta de substrato. · Ele ocupa o sítio ativo e impede o substrato de ligar, então é preciso mais substrato para saturar a enzima; saturando, o Vmax é o mesmo.
• Inibidor não competitivo (liga um sítio distinto do sítio ativo) · O Vmax DIMINUI e o Km não muda; aumentar o substrato não vence a inibição. · Ele não bloqueia a ligação do substrato, mas impede a reação seguinte: na prática reduz a concentração de enzima ativa.
• Inibidor incompetitivo (só liga a enzima depois que o substrato já ligou; raro) · O Vmax e o Km DIMINUEM os dois, e a velocidade observada é sempre menor que sem o inibidor. · Ligar ao complexo ES o retira do equilíbrio e favorece a formação de mais ES — por isso a afinidade aparente pelo substrato sobe, embora a reação fique mais lenta.

No padrão hepatocelular há aumento desproporcional de ALT e AST em relação à FA e à GGT; e a razão AST:ALT acima de 2 é útil sobretudo na doença hepática alcoólica.

FA isolada aumentada com GGT também aumentada aponta a origem hepatobiliar; e a FA pode estar aumentada sem doença, como em crianças e adolescentes (atividade osteoblástica do crescimento ósseo) e na gestação (produção pela placenta).

Em paciente com suspeita de infarto agudo do miocárdio, se há troponina quantitativa disponível, a diretriz brasileira manda NÃO solicitar CK-MB, porque a troponina tem sensibilidade e especificidade superiores.